Afin de compléter un procédé de propagation de microorganisme recombinant produisant une protéine d’intérêt, nous pouvons proposer la mise au point d’un protocole de récupération et de purification de cette protéine jusqu’à sa stabilisation par séchage. Notre laboratoire dispose de deux échelles de travail qui permettent soit la mise au point du procédé (Akta Avant) soit une montée en échelle vers des échelles pilotes (Akta Pilot). Cette seconde échelle nous permet de travailler avec des colonnes de plusieurs dizaines de litres et de valider la robustesse du procédé développé. Cette échelle permet, par exemple, la production de lots techniques préalables à un passage vers un environnement GMP. Au cours de ces étapes, nous pouvons également réaliser la mise au point du protocole de dosage de la protéine d’intérêt.
Prestations de service
Mise au point et scaling-up de procédé de purification de protéines par chromatographie
Downstream processing
Le downstream processing (DSP) est une succession d’étapes unitaires qui mènent de la récolte d’un bioproduit d’intérêt à sa formulation et qui ont pour objectif de le purifier et de le concentrer. Ces opérations succèdent à la production en bioréacteur et démarrent avec la séparation de la biomasse et du surnageant par centrifugation ou par filtration. Selon la localisation de la molécule d’intérêt, il sera nécessaire de lyser les cellules afin de récupérer une protéine intracellulaire ou sous forme de corps d’inclusion. Différentes étapes peuvent ensuite se succéder pour purifier et concentrer le produit, comme la purification par chromatographie, la purification et concentration par ultrafiltration, le changement de tampon par diafiltration. Ces différentes étapes peuvent être combinées afin d’atteindre le degré de pureté désiré. Outre les opérations de purification par chromatographie, notre laboratoire propose les différentes étapes d’un downstream processing complet ou uniquement l’une ou l’autre étape individuelle jusqu’à la stabilisation par séchage (lyophilisation). Ces opérations peuvent être réalisées sur des bioproduits issus d’une propagation en bioréacteurs ou sur des extraits naturels.